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2014-01-17什麼是試劑空白和樣品空白?

試劑空白:

試劑空白是指由于測試試劑本身而帶來的測試結果的微小的正誤差。由于生化測試測量的吸光度為相對吸光度,所以從理論上說,所有終點法的測試都需要把試劑本身的吸光度扣除。試劑本身的吸光度就是試劑空白。測量方法是按照正常測試的試劑和樣本量,把樣本換成蒸餾水來測量。

測試試劑的空白值對于一項測試尤為重要,當進行低濃度測定時應該從測試結果中扣除測試試劑的空白值。例如,如果從0.06mg/L的低濃度測試結果中減掉0.02mg/L的試劑空白值,就會使最終測定結果改變至少30%。而從1.23mg/L的高濃度測試結果中減掉0.02mg/L的試劑空白值,最終測定結果隻發生了2%的變化。

測定試劑的空白值時,需要使用高質量的去離子水代替待測樣品,加入測試試劑,按照操作步驟,進行常規測試。然後,從樣品的測定結果中減去測試試劑的空白值。不同批次的測試試劑其空白值會有所變化,所以,當使用不同批次的測試試劑時,需要重新對它的空白值進行測定。

在傳統手工方法中,每次測定都要做至少三個管:測定管、标準管、空白管。其中空白管是試劑加蒸餾水,測出來也就是試劑空白。因為操作環境、儀器狀态、試劑穩定性等變異,所以要求每次都要測定試劑空白,稱為實時試劑空白。

在全自動分析儀上,大體上是模拟手工操作。但許多全自動分析儀為追求速度,在設計上采用一些折中方法來測定試劑空白。有些全自動分析儀是做不了實時試劑空白,因為它們全是先加入樣本後加試劑。為了折中,隻好在定标時做一個試劑空白保存起來,需要扣除試劑空白時再減這個預先保存的值。這種做法,對于比較穩定的試劑來講,對結果影響不大。

總的說來,自動生化儀上的試劑空白一般表現為零點吸光度,該吸光度是通過校準确立的。

樣本空白:

樣品空白是指在某項測試程序中,使用某個樣品的濃度作為儀器的零基準。樣品空白可以抵消加入測試試劑前由于樣品自身存在的色度或濁度而引起的正誤差。由于溶血、脂血、黃疸等情況,會導緻樣本本身的吸光度對測試結果造成影響。所以對樣本本身吸光度的測量,即樣本空白,可以去除這方面的影響。測量方法是按照正常測試的試劑和樣本量,把試劑換成蒸餾水或生理鹽水來進行測量。自動生化儀上,很難界定樣本空白。與消除樣本空白有關的大約有如下幾點:

a).在雙試劑測定時,加入試劑1和樣品後的吸光度可一定程度上扣除樣本空白,所以有單試劑不能扣除樣本空白的說法。

b).現在優質的試劑的抗幹擾能力都比較強,比如有些雙試劑,R1加入後先和樣本孵育一段時間,将血紅蛋白、脂肪、膽紅素等反應掉,再加入R2開始測定反應。在一定範圍内都可以消除樣本空白。

c).現代全自動生化儀大多采用雙波長測定。雙波長測定的原則是根據幹擾組分和待測物質吸收光譜的峰形特征,選擇兩個波長和。使幹擾組分在這兩個波長處的吸光系數相等,而使待測物質在兩波長處的吸光系數有顯著差别。以兩波長分别測定分析溶液的吸光度,以兩個吸光度值之差(△A)計算。這也可以扣除一部分樣本空白。

d).有些儀器有專門的“血清信息”功能的設置。做法都是單獨占用一個空白通道來計算,這也叫做樣品空白校準。

在使用樣品空白對測試儀器進行調零後,隻有樣品與測試試劑發生反應而産生的色度被測定了。由于樣品的背景色度和濁度往往各不相同,樣品空白經常用來對儀器進行調零。

試劑空白和樣品空白的空白概念區别要點:**空白=隻含**的空白(吸光度)

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